ELISA試劑盒步驟及原理
ELISA試劑盒步驟及原理
基本原理：本試劑盒采用雙抗體夾心法。用抗Mouse ENA-78抗體包被于酶標板上，實驗時標本或標準品中的ENA-78會與包被抗體結合，游離的成分被洗去。依次加入化的抗Mouse ENA-78抗體和辣根過氧化物酶標記的親和素。抗Mouse ENA-78抗體與結合在包被抗體上的Mouse ENA-78結合、與親和素特異性結合而形成免疫復合物，游離的成分被洗去。加入發(fā)光底物混合液，發(fā)光底物在辣根過氧化物酶的催化下發(fā)出熒光，用化學發(fā)光免疫分析儀測定化學發(fā)光值（CL），ENA-78濃度與化學發(fā)光值之間呈正相關，通過繪制標準曲線求出標本中ENA-78的濃度。
操作步驟：
1、在各孔中加入標準品或樣品各 100μL，37℃孵育90分鐘
2、倒去孔內(nèi)液體，拍干，加入 100μL 化抗體工作液，37℃孵育 60 分鐘
3、洗滌 3 次
4、加入 100μL 酶結合物工作液， 37℃孵育 30 分鐘
5、洗滌 5 次
6、加入 100μL 底物溶液， 37℃孵育 5 分鐘左右
7、讀數(shù)
基本原理：本試劑盒采用雙抗體夾心法。用抗Mouse ENA-78抗體包被于酶標板上，實驗時標本或標準品中的ENA-78會與包被抗體結合，游離的成分被洗去。依次加入化的抗Mouse ENA-78抗體和辣根過氧化物酶標記的親和素。抗Mouse ENA-78抗體與結合在包被抗體上的Mouse ENA-78結合、與親和素特異性結合而形成免疫復合物，游離的成分被洗去。加入發(fā)光底物混合液，發(fā)光底物在辣根過氧化物酶的催化下發(fā)出熒光，用化學發(fā)光免疫分析儀測定化學發(fā)光值（CL），ENA-78濃度與化學發(fā)光值之間呈正相關，通過繪制標準曲線求出標本中ENA-78的濃度。
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