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17羥孕酮Elisa試劑盒競(jìng)爭(zhēng)法的實(shí)驗(yàn)原理

點(diǎn)擊次數(shù):1476 更新時(shí)間:2017-06-15

17羥孕酮Elisa試劑盒競(jìng)爭(zhēng)法一般分為直接競(jìng)爭(zhēng)法和間接競(jìng)爭(zhēng)法,這里我們以直接競(jìng)爭(zhēng)法為例進(jìn)行原理講解。直接競(jìng)爭(zhēng)法,其基本原理是:將合適濃度的包被抗體包被于微孔板中,加入無關(guān)蛋白載體封閉未結(jié)合位點(diǎn),加入標(biāo)準(zhǔn)品(樣本)和標(biāo)記的抗原物質(zhì)進(jìn)行競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合,經(jīng)合適的溫度和一定時(shí)間的孵育,洗滌后,加入HRP標(biāo)記的鏈霉親和素進(jìn)行反應(yīng),TMB顯色,微孔板中顏色的深淺與待測(cè)物的濃度呈負(fù)相關(guān)。
該方法一般用來檢測(cè)具有較少表位的小分子物質(zhì),當(dāng)然,這種方法也可以用來檢測(cè)大分子抗原物質(zhì)甚至是抗體。檢測(cè)大分子抗原物質(zhì)時(shí),由于空間位阻的影響,使得該檢測(cè)方法沒有雙抗體夾心法檢測(cè)大分子抗原物質(zhì)靈敏度高。這種方法在檢測(cè)抗體時(shí),可能由于兩種競(jìng)爭(zhēng)的抗體來源不一,導(dǎo)致兩種抗體趨同性不高,17羥孕酮Elisa試劑盒就使得檢測(cè)結(jié)果的可靠性不高。
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